紫外線消毒機器人的殺菌工作原理是通過紫外線燈發出的高能紫外線輻射，經照射后破壞微生物細胞的DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）的分子結構，造成生長性細胞和（或）再生性細胞死亡，達到除菌消毒的效果。而在紫外線的頻譜中，240nm-280nm（UVC）波段的紫外線是最有效的殺菌消毒波段。
值得關注的是，大部分病毒的RNA結構相對簡單，運用相應強度的UVC輻射即可有效殺滅相應的病菌（特別指出的是：2019-nCov（新型冠狀病毒）是由RNA復制，需要更加高效的殺菌措施才能扼殺病菌。在現行的醫療衛生消毒標準下，尤其是在醫療環境下，UVC屬于廣譜殺菌，能有效殺滅常見的病毒細菌，是高效便捷的殺菌消毒方式。